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生物缓冲液(PBS、HEPES)优缺点对比

生物缓冲液能有效稳定水溶液的pH值,所以被大量应用于生物实验中。殊不知,以往常用的传统缓冲液,如碳酸盐缓冲液和磷酸盐缓冲液,不适用来某些生物实验中。这些试剂在pH7.5以上不能有效缓冲,会形成某些干扰反应。所以,1966年NormanGood博士等人提出了一系列两性离子缓冲液,可以解决传统缓冲液的局限性。这些缓冲液的pKa值等于或接近生理pH值,对细胞无毒,不会被细胞膜吸收。在此中海生物技术小编简述一下经常使用的PBS缓冲剂和HEPES生物缓冲液优缺点。

生物缓冲液(PBS、HEPES)优缺点对比

  PBS HEPES
有效的pH范围 5.8-8.0 6.8-8.2
生物毒性 不具生物毒性
渗透压 具备等渗透压的特性,可防止细胞破裂。 使用 0.1 M HEPES 显著提高了培养基的渗透压。
细胞活力 PBS 稀释的细胞培养样品可能会无意中降低细胞活力。 HEPES 缓冲系统中可以看到更高的最大细胞密度和活力。
与金属离子的关系 与部分金属离子结合会产生络合物或沉淀。 可以忽略不计的金属离子产生络合物或沉淀。
与酶促反应的关系 可能会抑制酶促反应 适合用于酶促反应
HClO荧光检测 适用 不适用
在冷冻情况下的变化 PBS 溶液的冷冻导致显著的 pH 变化。 HEPES 溶液的冷冻不会导致 pH 变化。
用于电子显微镜研究的前缀固定剂 由于磷酸盐与二价阳离子有关。较高浓度的PBS会导致严重沉淀,从而阻止细胞有效过滤到过滤器上使用 Hepes 代替 PBS 避免了这种沉淀
用于层析法 于层析法中适用
高压灭菌 可以高压灭菌 不可以高压灭菌
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