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    胰酪大豆胨琼脂培养基验收的注意事项

    日期:2024-01-03 | 中海生物技术文库 | 浏览:309 次

    1、质控菌株的确认

      《中国药典》四部1105和1108中采用金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌、白色念珠菌和黑曲霉这五株标准菌株对TSA进行适用性检查;《中国药典》四部11061108中需用TSA对金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、大肠埃希菌和乙型副伤寒沙门菌进行菌液制备;《中国药典》四部1121中采用金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、大肠埃希菌、白色念珠菌和黑曲霉这五株标准菌株对TSA进行适用性检查;因此验收TSA的质控菌株可根据实验室的具体用途从相关通则中进行选择。

      值得注意的是,除了使用标准菌株验收TSA,还应增加生产环境及产品中常见的污染菌株。虽然标准菌株涵盖了自然环境中最为常见的微生物种类,包括革兰氏阳性球菌和杆菌、革兰氏阴性杆菌、产芽孢的杆菌以及真菌,但不能完全代表样品中部分较为特殊的菌群。曾有学者考察过8个厂家TSA(对药典要求的标准菌株均具有良好的促生长能力)对人参土芽孢杆菌的促生长能力(回收率)[1],结果培养5天后,仍有3个厂家TSA不能达到50%的回收率。即人参土芽孢杆菌对TSA的质量具有更好的筛选区分能力,该文章也建议将人参土芽孢杆菌作为质控菌株进行TSA的适用性试验,避免由于培养基促生长能力不足而导致误判的风险。

    2、pH值监控

      pH值是培养基的常规监控项目,TSA的标准为灭菌后在25℃的pH值为7.3±0.2

    3、培养基性状

    培养基性状也是验收TSA的关键项,直接影响能否顺利完成试验以及结果的准确性。

    对于商品化的脱水培养基,首先要确认干粉粉末是否均一,颜色是否发生变化,若为颗粒型培养基,需确认其粒度及溶解性;其次要确认灭菌后培养基外观颜色是否正常、是否澄清无异物;制备好平板后,软硬程度要适合涂布、划线、倒置培养等基础微生物操作;若采用倾注法,需确认融化的TSA培养基在45~50℃的环境中放置8小时无凝固现象。

     

    对于商品化的预制培养基,最重要的是培养基的无菌性检查;其次要确认外包装完整无损,无过多水汽,平板颜色正常、无异物、无气泡,倒置培养无掉板现象等。


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