专注研发微生物培养基、兽用诊断试剂盒生产厂家
全国销售服务热线:13001930979
  • 新闻资讯
  • 位置导航:中海生物>新闻资讯>技术文库>微生物实验常用的36种培养基的配制说明

    微生物实验常用的36种培养基的配制说明

    日期:2023-12-01 | 中海生物技术文库 | 浏览:298 次

    1.牛肉膏蛋白胨培养基(用于细菌培养)

    牛肉膏3g,蛋白胨10g,NaCl 5g,水1000mL,pH7.4~7.6。
     
    2.高氏1号培养基(用于放线菌培养)
    可溶性淀粉20g,KNO3 1g,NaCl 0.5g,K2HPO4•3H2O 0.5g,MgSO4•7H2O0.5g,FeSO4•7H2O0.01g,水1000mL,pH7.4~7.6。配制时注意:可溶性淀粉要先用冷水调匀后再加入到以上培养基中。
     
    3.马丁氏(Martin)培养基(用于从土壤中分离真菌)
    K2HPO41g,MgSO4•7H2O0.5g,蛋白胨5g,葡萄糖10g,1/3000孟加拉红水溶液100mL,水900mL,自然pH,121℃湿热灭菌30min。待培养基融化后冷却55~60℃时加入链霉素(链霉素含量为30μg/mL)。
     
    4.马铃薯培养基(PDA)(用于霉菌或酵母菌培养)
    马铃薯(去皮)200g,蔗糖(或葡萄糖)20g,水1000mL,配制方法如下:
    将马铃署去皮,切成约2cm2的小块,放入1500mL的烧杯中煮沸30min,注意用玻棒搅拌以防糊底,然后用双层纱布过滤,取其滤液加糖,再补足至1000mL,自然pH,霉菌用蔗糖,酵母菌用葡萄糖。
     
    5.察氏培养基(蔗糖硝酸钠培养基)(用于霉菌培养)
    蔗糖30g,NaNO3 2g,K2HPO4 1g,MgSO4•7H2O0.5g,KCl 0.5g,FeSO4•7H2O0.1g,水1000mL,pH7.0~7.2。
     
    6.Hayflik培养基(用于支原体培养)
    牛心消化液(或浸出液)1000mL,蛋白胨10g,NaCl 5g,琼脂15g,pH7.8~8.0,分装每瓶70mL,121℃湿热灭菌15min,待冷却至80℃左右,每70mL中加入马血清20mL,25%鲜酵母浸出液10mL,15醋酸铊水溶液2.5mL,青霉素G钾盐水溶液(20万单位以上)0.5mL,以上混合后倾注平板。
    *注意:醋酸铊是极毒的药品,需特别注意安全操作。
     
    7.麦氏(McCLary)培养基(醋酸钠培养基)
    葡萄糖0.1g, KCl 0.18g,酵母膏0.25g,醋酸钠0.82g,琼脂l.5g,蒸馏水l00mL。溶解后分装试管,1l5℃湿热灭菌15min。
     
    8.葡萄糖蛋白胨水培养基(用于V.P.反应和甲基红试验)
    蛋白胨0.5g,葡萄糖0.5g,K2HPO4 0.2g,水100mL,pH7.2,1l5℃湿热灭菌20min。
     
    9.蛋白胨水培养基(用于吲哚试验)
    蛋白胨10g,NaCl 5g,水1000mL,pH7.2~7.4,121℃湿热灭菌20min。
     
    10.糖发酵培养基(用于细菌糖发酵试验)
    蛋白胨0.2g,NaCl 0.5g,K2HPO4 0.02g,水100mL,溴麝香草酚蓝(1%水溶液)0.3mL,糖类lg。分别称取蛋白胨和NaCl溶于热水中,调pH至7.4,再加入溴麝香草酚蓝(先用少量95%乙醇溶解后,再加水配成1%水溶液),加入糖类,分装试管,装量4~5cm高,并倒放入一杜氏小管(管口向下,管内充满培养液)。115℃湿热灭菌20min。灭菌时注意适当延长煮沸时间,尽量把冷空气排尽以使杜氏小管内不残存气泡。常用的糖类,如葡萄糖、蔗糖、甘露糖、麦芽糖、乳糖、半乳糖等(后两种糖的用量常加大为1.5%)。
     
    11.RCM培养基(强化梭菌培养基)、(用于厌氧菌培养)
    酵母膏3g,牛肉膏l0g,蛋白胨10g,可溶性淀粉lg,葡萄糖5g, 半胱氨酸盐酸盐0.5g,NaCl 3g,NaAc 3g,水l000mL,pH8.5,刃天青3mg/L,l2l℃湿热灭菌30min。
     
    12.TYA培养基(用于厌氧菌培养)
    葡萄糖40g,牛肉膏2g,酵母膏2g,胰蛋白胨(bacto-typetone)6g,醋酸铵3g,KH2PO4 0.5g,MgSO4•7H2O0.2g,FeSO4•7H2O0.01g,水1000mL, pH6.5,121℃湿热灭菌30min。
     
    13.玉米醪培养基(用于厌氧菌培养)
    玉米粉65g,自来水1000mL,混匀,煮10min成糊状,自然pH,121℃湿热灭菌30min。
     
    14.中性红培养基(用于厌氧菌培养)
    葡萄糖40g,胰蛋白胨6g,酵母膏2g,牛肉膏2g,醋酸铵3g,KH2PO4 5g,中性红0.2g,MgSO4•7H2O0.2g,FeSO4•7H2O0.01g, 水1000mL,pH6.2,121℃湿热灭菌30min。
     
    15.CaCO3明胶麦芽汁培养基(用于厌氧菌培养)
    麦芽汁(6波美)1000mL,水1000mL,CaCO310g,明胶10g,pH6.8,121℃湿热灭菌30min。
     
    16.BCG牛乳培养基(用于乳酸发酵)
    (A)溶液:脱脂乳粉100g,水500mL,加入1.6%溴甲酚绿(B.C.G)乙醇溶液1mL,80℃灭菌20min。
    (B)溶液:酵母膏10g,水500mL,琼脂20g, pH6.8,121℃湿热灭菌20min。以无菌操作趁热将(A)、(B)溶液混合均匀后倒平板。
     
    17.乳酸菌培养基(用于乳酸发酵)
    牛肉膏5g,酵母膏5g,蛋白胨10g,葡萄糖10g,乳糖5g,NaCl 5g,水1000mL,pH6.8,121℃湿热灭菌20min。
     
    18.酒精发酵培养基(用于酒精发酵)
    蔗糖10g,MgSO4•7H2O0.5g,NH4NO30.5g,20%豆芽汁2mL,KH2PO4 0.5g,水100mL,自然pH。
     
    19.柯索夫培养基(用于钩端螺旋体培养)
    优质蛋白胨0.4g, NaCl0.7g,KCl 0.02g, NaHCO3 0.01g,CaCl 0.02g,KH2PO40.09g,NaH2PO40.48g,蒸馏水500mL,无菌兔血清40mL。
    制法:除兔血清外的其余各成分混合,加热溶解,调pH至7.2,121℃湿热灭菌20min,待冷却后,加入无菌兔血清,制成8%血清溶液,然后分装试管(5~10mL/管),56℃水浴灭活lh后备用。
     
    20.豆芽汁培养基
    黄豆芽500g,加水1000mL,煮沸lh,过滤后补足水分,121℃湿热灭菌后存放备用,此即为50%的豆芽汁;
    用于细菌培养:10%豆芽汁200mL,葡萄糖(或蔗糖)50g,水800mL,pH7.2~7.4。
    用于霉菌或酵母菌培养:10%豆芽汁200mL,糖50g,水800mL,自然pH。霉菌用蔗糖,酵母菌用葡萄糖。
     
    21.LB(Luria—Bertani)培养基(细菌培养,常在分子生物学中应用)
    双蒸馏水950mL,胰蛋白胨l0g,NaCl l0g,酵母提取物(bacto- yeast extract)5g,用lmol/L NaOH (约l mL) 调节pH值至7.0,加双蒸馏水至总体积为1L,121℃湿热灭菌30min。
    含氨苄青霉素LB培养基:待LB培养基灭菌后冷至50℃左右加入抗生素,至终浓度为80~100mg/L。
     
    22.复红亚硫酸钠培养基(远藤氏培养基)
    蛋白胨10g,牛肉浸膏5g,酵母浸膏5g,琼脂20g,乳糖10g,K2HPO40.5g,无水亚硫酸钠5g,5%碱性复红乙醇溶液20mL,蒸馏水1000mL。
    制作过程:先将蛋白胨、牛肉浸膏、酵母浸膏和琼脂加入到900mL水中,加热溶解,再加入K2PO4,溶解后补充水至l000mL,调pH至7.2~7.4。随后加入乳糖,混匀溶解后,于115℃湿热灭菌20min。再称取亚硫酸钠至一无菌空试管中,用少许无菌水使其溶解,在水浴中煮沸10min后,立即滴加于20mL5%碱性复红乙醇溶液中,直至深红色转变为淡粉红色为止。
    将此混合液全部加入到上述已灭菌的并仍保持融化状态的培养基中,混匀后立即倒平板,待凝固后存放冰箱备用,若颜色由淡红变为深红,则不能再用。
     
    23.乳糖蛋白胨半固体培养基(用于水体中大肠菌群测定)
    蛋白胨10g,牛肉浸膏5g,酵母膏5g,乳糖10g,琼脂5g,蒸馏水1000mL,pH7.2~7.4,分装试管(l0mL/管),115℃湿热灭菌20min。
     
    24.乳糖蛋白胨培养液(用于多管发酵法检测水体中大肠菌群)
    蛋白胨10g,牛肉膏3g,乳糖5g,NaCl 5g,蒸馏水l000mL,1.6%溴甲酚紫乙醇溶液lmL。调pH至7.2,分装试管(l0mL/管),并放入倒置杜氏小管,l15℃湿热灭菌20min。
     
    25.三倍浓乳糖蛋白胨培养液(用于水体中大肠菌群测定)
    将乳糖蛋白胨培养液中各营养成分以扩大3倍加入到l000mL水中,制法同上,分装于放有倒置杜氏小管的试管中,每管5mL,1l5℃湿热灭菌20min。
     
    26.伊红美蓝培养基(EMB培养基)(用于水体中大肠菌群测定和细菌转导)
    蛋白胨l0g,乳糖10g,K2HPO4 2g,琼脂25g,2%/伊红Y(曙红)水溶液20mL,0.5%美蓝(亚甲蓝)水溶液l3mL,pH7.4。
    制作过程:先将蛋白胨、乳糖、K2HPO4和琼脂混匀,加热溶解后,调pH至7.4,1l5℃湿热灭菌20min,然后加入已分别灭菌的伊红液和美蓝液,充分混匀,防止产生气泡。待培养基冷却到50℃左右倒平皿。如培养基太热会产生过多的凝集水,可在平板凝固后倒置存于冰箱备用。在细菌转导实验中用半乳糖代替乳糖,其余成分不变。
     
    27.加倍肉汤培养基(用于细菌转导)
    牛肉膏6g,蛋白胨20g,NaCl 10g,水1000mL,pH7.4~7.6。
     
    28.半固体素琼脂(用于细菌转导)
    琼脂1g,水100mL,121℃湿热灭菌30min。
     
    29.豆饼斜面培养基(用于产蛋白酶霉菌菌株筛选)
    豆饼100g加水5~6倍,煮出滤汁100mL,汁内加入KH2PO4 0.1%,MgSO4 0.05%,(NH4)2SO4  0.05%,可溶性淀粉2%,pH6,琼脂2%~2.5%。  
     
    30.酪素培养基(用于蛋白酶菌株筛选)
    分别配制A液和B液。
    A液:称取Na2HPO4•7H2O1.07g。干酪素4g,加适量蒸馏水,并加热溶解。
    B液:称取 KH2PO4 0.36g,加水溶解。A、B液混合后,加入酪素水解液0.3 mL,加琼脂20g,最后用蒸馏水定容至1000mL。
    酪素水解液的配制:1g酪蛋白溶于碱性缓冲液中,加入1%的枯草芽孢杆菌蛋白酶25mL加水至100mL,30℃水解l h。用于配制培养基时,其用量为1000mL,培养基中加入100mL以上水解液。
     
    31.细菌基本培养基(用于筛选营养缺陷型)   
    Na2HPO4•7H2O1g,MgSO4•7H2O0.2g,葡萄糖5g,NaCl 5g,K2HPO4lg,水l000mL,pH7.0,1l5℃湿热灭菌30min。
     
    32.YEPD培养基(用于酵母原生质体融合)
    酵母粉10g,蛋白胨20g,葡萄糖20g,蒸馏水1000mL,pH6.0,115℃湿热灭菌20min。
     
    33.YEPD高渗培养基(用于酵母原生质体融合)
    在YEPD培养基中加入0.6mol/L的NaCL,3%琼脂。
     
    34.YNB基本培养基(用于酵母原生质体融合)
    0.67%酵母氮碱基(YNB, 不含氨基酸,Difco),2%葡萄糖,3%琼脂,pH6.2。
    另一配方为:葡萄糖10g(NH4)2SO4 1g,K2HPO40.125g,KHPO4 0.875g,KI 0.0001g,MgSO4•7H2O0.5g,CaCl2•2H2O0.lg,NaCl0.1g,维量元素母液lmL,维生素母液lmL(母液均按常规配制),水1000mL,pH5.8~6.0。
     
    35.YNB高渗基本培养基(用于原生质体融合)
    在YNB基本培养基中加入0.6mol/LNaCl。
     
    36.酚红半固体柱状培养基(用于检查氧与菌生长的关系)
    蛋白胨1g,葡萄糖10g, 玉米浆10g,琼脂7g,水1000mL,pH7.2。在调好pH后,加入1.6%酚红溶液数滴,至培养基变为深红色,分装于大试管中,装量约为试管高度的1/2,1l5℃灭菌20min。细菌在此培养基中利用葡萄糖生长产酸,使酚红从红色变成黄色,在不同部位生长的细菌,可使培养基的相应部位颜色改变,但注意培养时间太长,酸可扩散以致不能正确判断结果。
    以上各种培养基均可配制成固体或半固体状态,只需改变琼脂用量即可,前者为1.5%~2.0%,后者为0.3%~0.8%。

    本文链接:https://www.zhzbio.com/news/wenku-36zpyj.html


    中海生物技术(枣庄)有限公司-培养基_诊断试剂生产厂家

    地址:山东省枣庄市市中区汇泉西路67-6号鲁南大健康产业园

    电话:13001930979

    鲁ICP备2021005701号-2

    北京中海生物科技有限公司

    地址:北京市海淀区中关村南大街8号中国兽医药品监察所院内

    电话:13001930979

    网站SiteMaP地图

    中海生物小程序

    中海生物技术公众号

      中海生物技术生产检验培养基公司_显色培养基_颗粒培养基_液体培养基_固体培养基_微生物培养基_干粉培养基_支原体培养基_即用型培养基厂家,畜禽牛羊猪马动物疫病兽用诊断试剂盒价格,专业为客户定制检测服务整套解决方案