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    伊红美蓝琼脂培养基EMB原理配方用途方法

    日期:2022-04-07 | 中海生物技术文库 | 浏览:93 次

    ㈠伊红美蓝琼脂培养基原理:

    伊红美蓝琼脂培养基算是弱选择性培养基,英文简称EMB培养基,通常用于分离鉴别肠道致病菌,尤其是大肠菌群和粪大肠菌群。蛋白胨供应碳源\氮源\维生素\生长因子等营养物质;乳糖是由大肠杆菌发酵的碳水化合物;磷酸氢二钾是培养基pH缓冲剂;琼脂是培养基的凝固剂;伊红又称曙红或四溴荧光素,为酸性染料,美蓝又称亚甲蓝,为碱性染料。它们都被用作培养基中的鉴别指示剂,以抑制革兰氏阳性菌的生长。

    大肠杆菌分解乳糖产酸时,细菌带正电,因此被染成红色,再与美蓝结合,产生紫黑色菌落,有金属光泽;产气肠杆菌呈褐色,几乎没有金属光泽。乳糖分解菌/沙门氏菌和志贺氏菌为乳糖发酵微生物,产生无色/透明或琥珀色菌落;凝固酶阳性葡萄球菌是具有无色针尖的菌落;白色念珠菌是蜘蛛丝或羽毛菌落。不致病/乳酸不发酵的革兰氏阴性菌也会在培养基上生长,需要通过其他的生化试验来分辨。

     

    ㈡伊红美蓝琼脂培养基EMB配方:

    成分(g/L)

    蛋白胨:10.0 

    琼脂粉:14.0 

    氯化钠:5.0

    伊红:0.4     

     乳糖:10.0

     美蓝:0.065

    牛肉浸出粉:3.0

    温度:25℃ PH值:7.0~7.4

     

    ㈢伊红美蓝琼脂培养基用途方法:

    称取中海伊红美蓝琼脂培养基干粉37.4g克,添加1.0升蒸馏水或去离子水,搅拌加热煮沸至完全溶解,在一百二十一度高压灭菌十五分钟后备用。

    使用中海生物伊红美蓝培养基鉴定水中大肠杆菌,具体操作流程如下所述:

    ⒈制作伊红美蓝培养基,趁热注入培养皿,浓缩成平板备用。

    ⒉取河水或沟水于高温灭菌锥形瓶中,以1比10稀释。

    ⒊在伊红美蓝培养基上接种0.1毫升稀释液。用划线平板法分离。

    ⒋将划线培养皿倒置,三十七度放置十八至二十四小时。培养基中会出现大肠杆菌菌落,深蓝色黑色点有金属光泽或无光泽。

    ⒌将菌落接种在斜面培养基上,由营养琼脂培养基制作而成。


    本文链接:https://www.zhzbio.com/news/wenku-embyuanli.html


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