平板接种后出现无菌生长的三种因素分析解释
日期:2021-12-15 | 中海生物技术文库 | 浏览:3123 次
在平板实验操作的过程中,常常会碰到用细菌病毒接种平板后沒有菌落生长发育的现象。中海生物技术小编来探讨一下出现这种现象的菌种原因和培养基及添加剂原因和技术人员操作方法原因等三种因素进行分析解释。
㈠菌种方面的因素:
①菌株沒有完全激活
在我们得到一种菌株时,该菌株常常处在存储情况,这就所需小编按照其合理的培养基一代一代地扩展培育,以得到充沛的菌株,因此完全活化的目的是使该菌株渐渐适应培育必要条件,进而在平板上迅速生长发育。
②应变衰老
假如菌株连续多次传代培养高于十多次乃至数十次,会造成菌株衰老,生长发育迟缓乃至不生长发育。
③野生菌株
与标准规范菌株相比较,一部分野生剥离菌株较为敏感脆弱,营养成分所需较高,对外部欠佳必要条件比较敏感,无法在普通平板上生长发育,常常所需加入特殊的营养元素。
④选购的商业化的菌株
一部分商业化的菌株,如复合益生菌/菌肥/食用菌菌种等,都历经了基因改造,又不可以连续传代培养和扩展,因此难以在平板上生长发育。
⑤试样中的细菌病毒
部分试样含菌量较少,如水样和供试品溶液,接种量低造成平板无菌生长发育。一部分试样富含一部分抑菌其成分,会杀死试样中的细菌病毒,造成平板无菌生长发育。
㈡技术人员操作方法不规范的因素:
①实验操作实际操作中的出现失误,尤其是溶解稀释菌液的过程中,尽量少用或不用菌。
②中海培养基制备的过程中称取量重不规范,添加剂配置比例不规范等。
③器皿沒有洗干净,鉴于残余抑菌其成分,细菌病毒沒有生长发育。
④过分杀毒灭菌,中 海培养基的许多其成分不耐高溫,过分杀毒灭菌会造成其成分不起作用。
⑤不规范的酸碱度上下调整,培养基的酸碱值在不一样的环境温度下会不尽相同,假如酸碱值上下调整不规范,细菌病毒就不易生长发育。
⑥沒有合理的培育必要条件,按照其不一样细菌病毒对氧气的所需状态,可以可划分为需氧/厌氧/微需氧培育。按照其不一样细菌病毒的环境温度所需,可在25℃/30℃/35℃/42℃/56℃等不一样环境温度下培育。
㈢培养基和添加剂的因素:
①培养基和添加剂高于有效期或临近有效期,营养元素有某种状态的不起作用,造成细菌病毒不生长发育。
②特殊专用培养基和添加剂未妥善处理存储/未遮阴/冷藏/严密密封存储等,因此造成出错。
③中.海培养基的酸碱值发生了转变,一部分特殊的制成品培养基的酸碱值会伴随着时长出现某种状态的转变,因此在使用前所需从新修整酸碱值,要不然细菌病毒不易生长发育。
④制成品培养基自身品质欠佳,如原料纯度低/富含抑菌其成分/原料间配置比例不规范等,会造成中海生物培养基质量不过关。
⑤培养基和添加剂沒有营养成分或不适宜培育部分菌株。部分菌株有特殊的的营养成分所需,所需加入一部分特殊的的营养元素才可以生长发育。
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