实验室自用培养基存放和商品化培养基储藏需注意的问题
日期:2021-11-01 | 中海生物技术文库 | 浏览:2061 次
一、检测实验室自用培养基存放
在检测实验室中,偶尔制备的微生物培养基没有用完,必须储存再次使用,很多时候需预先制备更多培养基备用,常常会面临半成品培养基的储存情况。取决于半成品或成品培养基有效期的关键原因是光泽/稳定/密封性。
⑴成份很简单的纯营养成分类培养基:这样的中海培养基较为比较稳定,一般而言室内温度可储存数日或几个星期,若密闭遮光冷冻冷藏储存,一般而言可储存几个月。
注:固体培养基用前可水浴加热或用微波炉加热溶解,一般而言只可以溶解一回,频繁的热处理溶解会造成营养成分减少和琼脂变的软,如只含蛋白胨/氯化钠/磷酸盐等成份较为比较稳定的中海培养基,营养肉汤/LB肉汤/缓冲蛋白胨水等。
⑵需添加不稳定成份的不完全培养基:可将未添加不稳定成份的基础性培养基在室内温度(一般而言可储存数日)或冷冻冷藏密闭(一般而言可储存几个星期或几个月)储存,临用前再添加不稳定成份制作而成完善培养基。若已添加不稳定成份,应在二至八摄氏度冷冻冷藏储存,尽早使用,如添加卵黄的MYP/添加羊血的血琼脂/添加抗生素的培养基等。注:一些液体培养基可以冷冻保存,溶解后不影响使用,但不可以冷冻包含琼脂培养基,结冰会破坏琼脂结构;固体培养基在使用前需加热溶化后再加入不稳定成分,加入不稳定成分后不可再加热。
⑶只能加热灭菌或过滤除菌的培养基:此类培养基相对较不稳定,建议现配现用,或二至八摄氏度冷藏保存数日,如XLD/亚硒酸盐胱氨酸增菌液等,内含不耐热成分。
二、商品化成品培养基储藏(脱水干燥培养基www.zhzbio.com即用型培养基)
(1)脱水干燥培养基储存
①相对湿度:干粉培养基极具较强的吸湿性,于是必须在储存的干燥的区域环境中,尤其是早已经开启的培养基,必须尽量避免在相对湿度低的区域环境中密闭储存。如储存环节中察觉培养基产生受潮结坨成块/粘稠变色等状况,则不可以使用。
注:部分培养基因干粉中添加了吐温80,化学式为C24H44O₆(C₂H₄O)ₙ。(如MRS培养基)等液态成份,粉末稍有黏连或小团状,能够很简单压碎,未必是受潮造成,不会影响使用。
②环境温度:多数商品化脱水培养基可常温状态储存(一般而言指十至三十摄氏度)或阴凉处储存(一般而言指不超过二十摄氏度),关于含不稳定成份的培养基(如有些抗生素\显色底物等),可在二至八摄氏度冷冻冷藏储存。储存环境温度过高易造成有些不稳定成份变性或降解。
③光照强度:中.海任何培养基都应防止阳光照射,放置在阴暗处储存,含对光比较敏感成份的培养基应使用一定的遮光办法储存。
中海小结:区域环境的相对湿度、环境温度和光照强度是会影响培养基储存有效期限的关键要素,未打开的商品化培养基应遵循详细说明放置在特定的环境下储存,已打开的中 海培养基应使用合适的密闭办法,或尽量避免减少储存区域环境的环境温度与相对湿度,更能帮助培养基的储存。
(2)即用型培养基储存
⑴试管或液体瓶装培养基/均质袋等:商品化的即用型通常采取了有效的灭菌方式和密封保存,未开封前按说明保存即可;若已开封,应做好有效措施防止污染,密闭保存,含不稳定成分的应冷藏保存。
注:一些含染料或酸碱指示剂的中'海培养基应注意避光保存,如煌绿乳糖胆盐/RV肉汤/乳糖蛋白胨等培养基,长时间见光易发生变色。
⑵琼脂斜面/平皿等:大多数商品化的琼脂培养基建议保存在二十摄氏度左右的环境中,含不稳定成分的琼脂培养基可置于五摄氏度左右的冷库中保存。
①目前市场上大多数的平皿保存温度都写室温或五至二十五摄氏度的一个很宽的保存范围,但在实际保存过程中受水份蒸发和冷凝水的影响,建议保存在二十摄氏度左右效果更佳,温度过低易出现冷凝水,温度过高易导致中海生物培养基失水。
②不建议使用普通冰箱保存。冰箱的温度相对不稳定,制冷过程中 海温度偏低易起霜/易导致培养基结冰,长期在冰箱中保存易导致琼脂出现冰晶,结构被将破坏。若要使用普通冰箱,建议将中.海生物培养基放置在远离制冷或靠壁的位置,冷藏温度尽量调高一些。
③拆封后的平皿不易久存,因为在非密闭环境中平皿易逐渐失水变薄。
⑶即用型生化管/鉴定条等:一些成分简单的生化管(如蛋白胨水/嗜盐性胰胨水等)可在室温条件下存放较长时间,含酸碱指示剂的需要避光保存,在冷藏条件下可保存更长时间。
⑷试剂盒/染色液等:建议按照说明书保存,冷藏条件更稳定。
中海生物总结:低温/避光/密封/工艺等决定即用型培养基的有效期长短关键外在因素。对于含不稳定成分的培养基,低温和避光是延长有效期的重要方法;对于包含琼脂培养基,在冷藏时需注意不可使培养基结冰。
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