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    关于培养基制备与使用常见六个问题解答

    日期:2021-09-01 | 中海生物技术文库 | 浏览:124 次

    中海生物技术关于培养基制备zhzbio.com培养基使用的常见六个问题做以下解答,希望会对大家有所帮助。

     

    问题一:低血清培养基的pH值可以用肉眼判断吗?

    解答:低血清培养基中 海酚红的含量与正常培养基中酚红的含量不同。pH 值无法通过目测或经验确定。倡导采取专用pH计进行检测判定。 

    问题二:低血清培养基的缓冲系统是什么?

    解答:平衡盐一般由无机盐和葡萄糖组成。平衡盐包括有Earles系统/Hanks系统/Dulbeccos磷酸缓冲盐系统等。MEM系列培养基和199系列培养基均有Hanks系统的培养基及Earles系统的培养基。然而部分培养基采用的不是上述常规平衡盐系统,举例RPMI 1640培养基和F12培养基。MEM(SLM)低血清培养基也不是常规的平衡盐系统,其平衡盐系统的缓冲能力强于常规的平衡盐系统。 

    问题三:谷氨酰胺溶液和碳酸氢钠的制备方法是什么?

    解答:以制备0.2摩尔/升的L-谷氨酰胺为例:称取2.92克L-谷氨酰胺,加100毫升注射用水,完全搅拌均匀。使用0.2μm滤膜过滤除菌。溶液需在 4°C 下储存并避光,并在14天内使用。以制备7.5%碳酸氢钠为例:称取7.5克碳酸氢钠溶解于100毫升蒸馏水中除菌过滤。 

    问题四:什么样的培养基可以不加酚红?

    解答:酚红在培养基中主要用作pH指示剂:酸性时为黄色,碱性时呈紫色,呈中性时为红色。酚红本身不影响中海生物制品质量,能够通过纯化技术去除。然而无血清培养基中的酚红可能会导致细胞内钠、钾失衡并影响细胞孕育。这种效果必然可以被血清吸收和或减轻。酚红不是中.海培养基中需求的重要成分。国外许多疫苗或抗体制造商在制作生产过程中使用无酚红培养基。 

    问题五:为什么放入冰箱的培养基颜色会发生改变?

    解答: 培养基储藏在4°C的冰箱中。培养基中的二氧化碳会逐渐释放,使培养基碱性越大。通常培养基中海的酸碱指示剂是酚红,随着碱度的增加,颜色也随之变深变红。倘若培养基碱性太强又用在细胞培养上,势必会导致细胞生长停滞与死亡。当培养基碱性太强状态需要通过无菌过滤的二氧化碳来调节pH值。 

    问题六:有血清培养基和无血清培养基的抗生素用量相同吗?

    解答:在无血清培养环境情况,抗生素是不会被灭活。中'海无血清培养基中添加抗生素时,至少降低血清中使用的浓度50%。由于血清中的蛋白质相互结合并灭活部分抗生素。


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