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    培养基的设计

    日期:2023-12-22 | 中海生物技术文库 | 浏览:473 次

    培养基营养物质浓度的组成和比列

    培养基的成分确定后,每种营养物质的浓度和比列要合适,要达到微生物生长的最适条件下微生物才能迅速生长。营养物质的浓度太低不能满足微生物的生长需要,太高又会抑制微生物的生长。比如金属离子是微生物生长不可缺少的矿物质养分,但如果矿物质的浓度过大就会抑制菌体的生长,甚至杀死菌体。碳氮比(C/N)是影响微生物生长繁殖和代谢积累的重要因素,常作为一个指标来衡量之间的搭配,如在谷氨酸发酵中,当培养基(C/N)比为4:1时,菌体大量繁殖,谷氨酸积累减少;当培养基(C/N)比为3∶1时,菌体繁殖受到抑制,谷氨酸大量增加。一般培养基碳氮比(C/N)100:(0.5-2)

    调节培养基的pH值

    在设计培养基时,除微生物营养物质之间的比列外,pH值也是微生物生长繁殖和代谢积累很重要的一个环境指标。一般来说,细菌适合pH7.0-7.5,酵母菌为3.8-6.0,霉菌为4.0-5.8,放线菌为7.5-8.5。但微生物在生长代谢过程中,由于营养物质的利用以代谢产物的形式积累,有时会引起pH值的变化,因此为了维持培养基pH值的相对稳定,特殊情况下需要在培养基中加入pH缓冲剂,来调节pH值满足微生物在生长范围内。如在培养基中常用磷酸盐(K2HPO4KH2PO4作缓冲剂,因为K2HPO4是碱性,KH2PO4是酸性,当微生物代谢导致酸性物质积累,H+含量增加时,这时的弱碱物质K2HPO4变成了弱酸盐KH2PO4,溶液的pH值降低不大;反之,OH-增加时,这时弱酸盐KH2PO4变成了弱碱盐K2HPO4,溶液的pH值升高不大。

    调节培养基的渗透压

    微生物的细胞膜是半透膜,在低渗透压的条件下,当外部环境溶液浓度低于细胞内部环境,水分子会由低渗透溶液进入细胞,导致细胞的膨胀甚至破裂;反之,当外部环境溶液浓度高于细胞内部环境,渗透会迫使水从细胞内部扩散出来,导致细胞皱缩,细胞壁与细胞膜分开质壁分离。因此,微生物只有在等渗的条件下才能生长。所以在配制培养基的过程中,要控制好各营养物质的浓度大小。通常在培养基中适当加入氯化钠以提高渗透压。


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