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    禽流感(H9 亚型)血凝抑制试验抗原使用说明书

    日期:2023-12-06 | 中海生物技术文库 | 浏览:325 次

    【兽药名称】
    通用名称:禽流感(H9 亚型)血凝抑制试验抗原
    商品名称:无
    英文名称:Avian Influenza Virus(H9 subtype) Antigen for
    Blood Hemagglutination Inhibition Test
    汉 语 拼 音 : Qiuliugan(H9 yaxing)Xueningyizhishiyan
    Kangyuan
    【主要成分与含量】本抗原为灭活的禽流感(H9 亚型)病毒,
    血凝效价≧1:128(即 2
    7
    【性状】为疏松团块。
    【作用与用途】适用于血凝抑制试验检测禽流感(H9 亚型)病
    毒抗体
    【用法与判定】
    1 材料
    移液器及吸头、1/15mol/L PBS(pH 值 7.0-7.2)、96 孔微量血
    凝板(V 型)、1%(V/V)鸡红细胞悬液、加样槽等。
    2 试验操作
    2.1 血凝试验(HA)
    2.1.1 96 孔微量血凝板 1-12 孔加入 PBS0.025ml,取抗原 0.025ml
    加入第 1 孔中,反复稀释 5~10 次混匀,从第 1 孔中取 0.025ml 加入第 2 孔,稀释混匀取 0.025ml 加入第 3 孔,依此倍比稀释至第 11 孔,
    第 12 孔作为红细胞对照孔。每孔补加 PBS0.025ml,再加入 1%(V/V)
    鸡红细胞悬液 0.025ml,血凝板震荡混匀,室温放置 15~40 分钟或
    置 2~8℃40~60 分钟。
    2.1.2 结果判定 将血凝板倾斜 60 度,当对照孔中的红细胞呈显
    著流淌的泪滴状时判读结果。以使红细胞完全凝集的最高稀释度作为
    血凝价。
    2.2 血凝抑制试验(HI)
    2.2.1 依据抗原 HA 血凝效价,配制 4 个血凝单位抗原(4HAU)。
    举例:血凝效价为 1:128,即 128/4=32(即稀释倍数为 1:32)。取 PBS
    9ml,加入抗原 1.0ml,(即成 1:10 稀释)震荡混匀取 1.0ml,加入
    2.2mlPBS 中,使最终浓度为 1:32。对其血凝价进行回归检验校准后,
    2~8℃存放待用。
    2.2.2 96 孔微量血凝板 1-11 孔加入 PBS0.025ml,第 12 孔加入
    PBS0.05ml,取待检血清 0.025ml 加入第 1 孔中,反复稀释 5~10 次
    混匀,从第 1 孔中取 0.025ml 加入第 2 孔,稀释混匀取 0.025ml 加入
    第3孔,依此倍比稀释至第10孔。取4HAU于1-11孔每孔加入0.025ml,
    血凝板震荡混匀,37℃作用 20 分钟。再每孔加入 1%(V/V)鸡红细
    胞悬液 0.025ml。第 11 孔为 4HAU 对照孔,第 12 孔为红细胞对照孔。
    将血凝板震荡混匀,室温放置 15~40 分钟。
    2.2.3 结果判定 将血凝板倾斜 60 度,若 4HAU 对照孔无红细胞
    凝集,红细胞对照孔有红细胞凝集,且呈明显流淌的泪滴状时,试验成立,可判读结果。使红细胞凝集被完全抑制的血清最高稀释度判为
    被检血清 HI 效价。
    【注意事项】
    1.倍比稀释时,吸液、吐液动作不应过快,防止污染其他孔及
    取量不准确。
    2.4HAU 应现用现配,使用时充分混匀。
    3.使用 1%鸡红细胞悬液时,应轻摇混匀。
    4.因环境温度不同,判定结果时,可依据对照孔情况,适当调
    整作用时间。
    5.设立阴、阳性血清对照,且当阴性对照血清 HI 效价≦1:4、
    阳性对照血清 HI 效价与已知结果相比,误差≤1 个稀释度时,试验
    方可成立。
    6.抗原使用前需用无菌生理盐水复溶。
    【规格】 2ml/瓶
    【贮藏与有效期】 -15℃以下保存,有效期为 12 个月
    【包装】 10 瓶/盒
     
    仅供兽医诊断使用

    本文链接:https://www.zhzbio.com/news/wenku-qlgh9.html


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