微生物培养基使用常遇到的六种问题解答
日期:2021-07-02 | 中海生物技术文库 | 浏览:970 次
在使用微生物培养基过程中,发现一些技术人员对培养基使用存在偏差。中海生物技术zhzbio.com微生物培养基使用中常遇到的问题解答与大家分享和讨论常见。
问题一:高压灭菌是在培养基煮沸溶解后顺序?
解答:以中海麦康凯琼脂培养基为例:溶解灭菌后,盘子上无不溶性结晶紫、无紫色斑;与未溶解和消毒的盘子相比,盘子上有结晶紫和紫色斑点。因此正确的步骤顺序是在高压灭菌前需要进行培养基煮沸溶解。
问题二:培养基pH值不在标准范围内的问题?
解答:出现此类情况有很多原因,中海生物大致分为①厂家质量:出厂时pH不稳定。②灭菌问题:是蒸压过高或杀菌时间过长,导致葡萄糖焦化,因此,pH值降低。③存放周期:保存时间超过保质期或结块水的质量有问题。④水质问题:采用去离子水/蒸馏水/纯净水等,不要采用矿泉水和自来水。⑤存储温度:储存温度过高。⑥光线直射等六种原因,可逐一检查排除解决问题。
问题三:如何测定培养基的pH值?
解答:中'海对于不需要高压灭菌的培养基,先煮沸溶解后冷却至二十五度,确定pH值;对需要高压灭菌的介质取平均值,高压灭菌后冷却至二十五度,这两种状况测量培养基pH值,固体培养基至少检测两个点,取它们的平均值。
问题四:高压灭菌造成培养基结焦焦化问题?
解答:在实验过程中,检测人员发现在高压灭菌后的培养基有结焦焦化现象。中海微生物认为造成这种现象是:控制培养基在容器中不要超过百分之八十,避免填充过多。注意控制高压灭菌时间过长(115-116度)二十分钟即可,温度不超过121度,而且灭菌后的培养基在高温环境中不要长时间存放。以上原因都会导致培养基结焦焦化。
问题五:含琼脂的培养基有时在平板上不凝固或凝固不好问题?
解答:在此种情况下,中海生物技术建议:对于需要高压灭菌的培养基, 倒入平板前先摇一摇。主要是琼脂培养基的分子量比较大,在冷却过程中容易沉淀到底,造成琼脂不能均匀分布。对于无需高压灭菌的培养基,不能直接煮沸溶解后倒入平板、需要重复三至五次煮沸溶解过程,因一次无法保证琼脂完全溶解。
问题六:同一品牌不同批号的粉末颜色不一样问题?
解答:中.海分析可能有:微生物培养基成分中含有染料或指示剂;不同批次的粉状培养基含水量不同。一般要求≤6。含水量越高,颜色越深;研磨时间越长,颜色越深等三个原因。
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