专注研发微生物培养基、兽用诊断试剂盒生产厂家
全国销售服务热线:13001930979 微信同号
  • 新闻资讯
  • 位置导航:中海生物>新闻资讯>技术文库>改良Frey氏培养基(液体|固体|辅助液)使用说明书附培养基检验

    改良Frey氏培养基(液体|固体|辅助液)使用说明书附培养基检验

    日期:2022-03-04 | 中海生物技术文库 | 浏览:96 次

    改良Frey氏培养基(液体|固体|辅助液)使用方法说明书

    改良Frey氏培养基使用说明书

    【产品名称】

    中文名称:改良Frey氏培养基

    英文名称:Frey Medium,Modified

    汉语拼音:Gailiang Freyshi Peiyangji

    【性    状】  液体培养基为澄清、玫瑰红色液体;固体培养基为淡黄色固体,加热融化后无絮状物或沉淀;固体培养基辅助液为淡黄色或玫瑰红色液体。

    【作用与用途】  用于检验禽源兽用生物制品中的支原体。

    【用法与判定】

    1. 液体培养基  分装后使用。分装量为:小瓶20ml/瓶,小管1.8ml/支。

    2. 固体培养基  将固体培养基基础成分加热融化,当温度降到60℃左右时添加辅助液(60ml固体培养基+13ml辅助液),混合均匀后按平皿规格加入适量培养基(例如直径60mm的平皿加入固体培养基9ml)制成固体平板。

    3. 检验  取样品5ml接种小瓶液体培养基,混匀后再从小瓶中取液体,分别移植到2支小管液体培养基(0.2ml/支)、2付固体平板(0.1~0.2ml/付),将小瓶与小管放37℃培养,固体培养基放置37℃、5%CO2培养箱中培养。接种后第5日、第10日、第15日从小瓶中取培养物移植2支小管液体培养基(0.2ml/支)和2付固体平板(0.1~0.2ml/付)。每日观察培养物颜色有无变黄或变紫红的现象,若无变化,在最后1次移植培养14日后停止观察。在观察期内,如小瓶或任何1支小管培养物颜色出现明显变化(pH变化达±0.5)时,应立即移植于2支小管液体培养基和2副固体平板进行培养,观察液体培养基是否出现恒定的pH变化以及固体培养基有无支原体菌落生长。

    每次检验时,均应同时设立阴、阳性对照。阳性对照为接种1~10CFU/0.2ml质控菌液(鸡滑液支原体GX11-T株)的小管液体培养基,和接种1~50CFU/0.2ml质控菌液的固体平板培养基;阴性对照为接种灭菌生理盐水的小管液体培养基和固体平板培养基,同上法培养和观察。

    4. 结果判定

    4.1 检测结果有效性  当阳性对照液体培养基出现颜色变黄,固体平板上出现支原体菌落;阴性对照液体培养基不变色,固体平板上无支原体菌落时,检验有效,并作如下判定。

    4.2 判定  若接种样品的小瓶或小管培养基出现颜色变黄,且固体平板上可见支原体菌落,则判该样品有支原体污染。

    【注意事项】

    1. 中海培养基若自低温环境取出,恢复到室温后使用。

    2. 制备固体平板时,辅助液应沿着瓶壁加入,添加后轻轻摇动,避免出现气泡。

    3. 进行培养基灵敏度检验时的试管或吸管,建议按组织细胞培养要求清洗,或使用一次性无菌试管。否则,可能会有近半数左右的灵敏度低一个滴度。

    4. 如液体培养基出现浑浊或变色,固体培养基平板表面干裂,应停止使用。

    【规    格】  改良Frey氏液体培养基80ml/瓶;改良Frey氏固体培养基60ml/瓶;改良Frey氏固体培养基辅助液13ml/瓶。

    【贮藏与有效期】  改良Frey氏液体培养基-20℃以下保存,有效期为12个月;改良Frey氏固体培养基2~8℃保存,有效期为12个月;改良Frey氏固体培养基辅助液-20℃以下保存,有效期为12个月。

    【生产企业】  北京中海生物科技有限公司

                  中海生物技术(枣庄)有限公司  

                  网址:www.zhzbio.com                    

     

    仅供兽医诊断使用

     

    附:培养基检验

    1. 质控菌株  检验用质控菌株为鸡滑液支原体GX11-T株。将冻干种子恢复原量以10%的量接种改良Frey氏液体培养基,经35~37℃培养至变色,作为第1代;将第1代培养基物按10%接种量接种改良Frey氏液体培养基,35~37℃培养12~72h,取活菌滴度≥108CCU/ml培养物作为工作种子。在使用过程中冻干种子传代次数不超过5代,工作种子在-20℃以下保存有效期为30日。

    2. 检验方法

    2.1 灵敏度试验

    (1)培养  取工作种子液用待检液体培养基进行10倍系列稀释至10-10,另设1支未接种液体培养基作为对照,置35~37℃培养5~7日;取10-6稀释度菌液0.2ml接种于固体培养基平板1个,另设1个未接种固体培养基平板作为对照,置37℃、5%CO2培养箱中培养5~7日。同时各做2组重复。

    (2)结果判定  以培养基呈现生长变色的最高稀释度作为其灵敏度。如果2组培养基灵敏度均≥10-8,对照不变色;固体培养基均有支原体菌落生长,对照无支原体菌落生长,判培养基合格。若仅1组液体培养基灵敏度≥10-8,或1组固体培养基有支原体菌落生长,取2倍待检品重检。重检后,如液体培养基灵敏度均≥10-8,固体培养基均有支原体菌落生长,判为合格。否则,判为不合格。

     


    支原体培养基使用说明书               无血清培养基使用说明书


     


    本文链接:https://www.zhzbio.com/news/wenku-gailiangFrey.html


    中海生物技术(枣庄)有限公司

    地址:山东省枣庄市市中区汇泉西路67-6号鲁南大健康产业园

    电话:13001930979 微信同号

    鲁ICP备2021005701号-2

    北京中海生物科技有限公司

    地址:北京市海淀区中关村南大街8号中国兽医药品监察所院内

    电话:010-6210 3682  传真:010-6215 9349

    网站SiteMaP地图  枣庄网站建设

    中海小程序扫码

    中海小程序扫码

    关注中海公众号

    关注中海公众号

      中海生物技术生产检验培养基公司/显色培养基/颗粒培养基/液体培养基/固体培养基/微生物培养基/干粉培养基/支原体培养基/即用型培养基厂家,畜禽牛羊猪马动物疫病兽用诊断试剂盒价格,专业为客户定制检测服务整套解决方案