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    鸡新城疫血凝抑制试验抗原使用说明书

    日期:2022-05-19 | 中海生物技术文库 | 浏览:40 次

    【名称】 鸡新城疫血凝抑制试验抗原使用说明书

    本抗原系用鸡新城疫病毒La Sota株接种SPF鸡胚培养,收获尿囊液,经离心后灭活制成。抗原的红细胞凝集效价不低于1:256。用于检测鸡新城疫的抗体。

    【用法和判定】 

    1  抗原工作液制备

    1.1 抗原凝集价测定

    使用96孔板按表1进行。用稀释液将抗原倍比稀释成不同倍数,加入1%鸡红细胞悬液,再加入等量的稀释液。将96孔微量板在振荡器上摇匀,在20~30℃条件下放置20~40分钟,当红细胞对照孔中的红细胞呈显著纽扣状时判定结果。使红细胞完全凝集的最高稀释度,作为判定终点。

    鸡新城疫血凝抑制试验抗原使用说明书图1

    1.2  抗原工作液配制及检验

    1.2.1  4×HA抗原的配制:如抗原凝集价测定结果为1:256,4个血凝单位(即4×HA)=256/4=64(即1:64)。取31.5ml 稀释液,加抗原0.5ml,使最终浓度为1:64。

    1.2.2  4×HA抗原的验证

    将配制的1:64倍稀释的抗原液分别取0.5ml的量加入0.5ml 、1.0ml、1.5ml、2.0ml、2.5ml和3.0ml的稀释液中,使最终稀释度为1:2、1:3、1:4、1:5、1:6和1:7。然后,从每一稀释度取液体0.025ml,加入1%鸡红细胞悬液0.025ml,再加入0.025ml 稀释液,混匀。将血凝板在室温下放置20~40分钟后,如配制的抗原液为4×HA,则1:4稀释度将给出完全凝集终点;如4×HA高于4个单位,可能1:5或1:6为终点;如果较低,可能1:2或1:3为终点。应根据检验结果做适当调整,使工作液确为4×HA。

    2  血凝抑制试验(HI)

    2.1  用稀释液将被检血清做2倍倍比稀释,加入含4×HA的抗原液,并设阴、阳性血清对照,充分振荡后,置20~30℃下作用30分钟;再加入1%鸡红细胞悬液,在20~30℃下放置20~40分钟,当红细胞对照孔中的红细胞呈显著纽扣状时判定结果。使红细胞凝集完全抑制的血清最高稀释度作为判定终点。

    鸡新城疫血凝抑制试验抗原使用说明书图2

    【注意事项】

    1.试验应在20~30℃条件下进行,每次检测时应设阳性、阴性血清(稀释方法同被检血清)及红细胞对照。

    2.工作浓度的抗原应现配现用,使用时抗原必须充分摇匀。

    3.应将使用剂量的抗原无菌吸出,剩余抗原放回冰箱保存。

    4.只用于检验鸡血清,不能用于鸡全血反应。

    【规格】 抗原 2.0ml/瓶,20×稀释液 30ml/瓶。

    【贮藏与有效期】 2~8℃保存,有效期为24个月。

    【生产企业】  北京中海生物科技有限公司

                  中海生物技术(枣庄)有限公司  

                  网址:www.zhzbio.com  

    仅在兽医指导下使用

     


    本文链接:https://www.zhzbio.com/news/wenku-jxcyxnyzsyky.html


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