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    酶联免疫实验操作中复测问题分析

    日期:2022-01-07 | 中海生物技术文库 | 浏览:32 次

    在酶联免疫实验操作的过程中常常会存在复测问题,即咱们常常说的花板问题,此种问题影响到检验检测结论的准确判定,对工作任务带来相应的不良影响,如若产生花板现象,实验操作结论务必选择放弃,中海生物操作员需再次开展检验检测,不但消耗原材料和时长,同时还可能会存在样本量缺失/交叉式被污染/汇报时间延迟等多方面问题。

     

    ㈠标本问题

    要严格规范正确处理样本,预防血浆层大规模溶血和异物,使用一次性采样枪头,避免交叉污染。血清和血浆均可用于检测,但血清的分离应在血液完全凝固后进行离心操作。

     

    ㈡试剂问题

    保存并正确使用有效试剂。与金属容器接触的过期试剂和底物的使用,以及底物混合后较长的储存时间都影响实验结果的准确性。中海选择试剂时,应选择灵敏度高\特异性好\稳定性好\批间差异小的试剂。不同制造商的试剂不应混合,包括底物和洗涤液。测试前,兽用诊断试剂应在室温下放置半小时进行平衡,现在应准备好清洗液。同时中海生物观察浓缩清洗液中是否有结晶。如果有结晶,放入三十七度的水浴中融化后再使用。

     

    ㈢操作问题

    严格按照相关实验室的标准操作规程进行试验。中海生物技术人员添加样品时,尽可能垂直添加样品,并将其添加到涂层孔的底部。注意:不要过度用力破坏底部涂层材料,也不要将其添加到孔的上部和外部。

     

    ㈣温浴问题

    当水浴箱用作温水浴装置时,应注意水深对结果的影响。当水浴箱中水的实测温度为三十七度时,水面温度可能只有三十四度,空气温度更低,甚至只有二十多度。因此当水浴箱内水位过低时,酶标微孔板不会浸入水中,反应温度不会达到三十七度,会相应影响酶促反应。为了防止边缘效应,酶联免疫吸附试验板应尽可能浸入水中,从而保证加热均匀。水浴中,海应密封酶联免疫吸附试验板,防止水滴滴入包被孔或阳性样品蒸发。严格控制暖浴时间,不要为了早出效果而随意缩短暖浴时间。

     

    ㈤洗板机问题

    废液瓶装满后要及时倒空,防止废液回流污染管道,导致冲洗不彻底,容易出现花板。洗完板后用蒸馏水彻底清洗管道,防止废液残留在管道内。同时应根据中海仪器维护程序定期维护洗衣机。

     

    ㈥酶标仪问题

    酶标仪应放在遮阳避光的地方,比色前应打开预热十五至三十分钟,这样测定结果会更稳定。为防止显色加深或减弱,显色时间结束后应立即滴止液,避免产生气泡,十分钟内完成比色。将酶标板从水浴箱中取出后,擦去孔底的水滴。如果有水滴或纸屑残留在孔底,酶标阅读器的读数就会出现错误,往往被误判为花板。


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