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    ELISA试剂盒挑选注意四个方面

    日期:2022-05-10 | 中海生物技术文库 | 浏览:24 次

    现在科学技术和新兴产业的发展,ELISA试剂盒对化学试剂的纯度\纯度\精密度的需求越来越严格和专业化。ELISA试剂盒的挑选很重要,中海生物认为大致有四个方面:

    ❶检测方法

    尽管,ELISA试剂盒的检测方式方法有很多,我们可以按照自身的偏好来选购。通常ELISA检测酶促反应的可溶性产物,抗体与相对应的酶结合,反应体系中添加相对应的底物。这样的酶促反应造成特征颜色,可以用分光光度计检测。碱性磷酸酶ap也是一类常见的酶。该酶可以与第一抗体或第二抗体结合,同时链霉亲和素标记的酶也能够与亲和素标记的第一抗体结合。另外ELISA结果还包含放射性检测/荧光检测/化学发光或显色检测等。

    ❷实验操作形式

    尽管类型诸多,但会出现一项相同的特点,便是抗原捕获。捕获的通常形式包含将抗原吸附到微孔板或在微孔板上用抗体捕获。酶联免疫斑点和in-cell Elisa是两种特殊类型。in-cellElisa需要将微孔板培养的细胞固定化/通透化,随后用抗体原位检测。酶联免疫斑点有点像蛋白印迹,先将细胞培养在膜微孔板中,随后在膜上检测细胞分泌的抗原,形成斑点。另外中海建议需要按照自身的需要选购九十六孔板或四十八孔板进行Elisa实验操作。

    ❸抗体形式

    单克隆抗体和多克隆抗体都能够用作Elisa,但有时候两者的组合更好。例如双抗体夹心法,用多抗体捕捉,用单抗体检测,有时候更有帮助。多抗体可以确保捕获全部抗原,随后单克隆抗体可以特异性检测具有特定表位的抗原。

    ❹交叉反应

    假如抗体之间有冲突或交叉反应,会影响所有实验操作的特异性。抗体来源的相容性是交叉反应的一项原因。尽管从支钉动物身上购买抗体越来越容易,但仍然需要确认是不是会出现交叉反应。用双抗体夹心法进行Elisa时,检测用的第二抗体务必对第一抗体有特异性,但无法与捕获抗体反应。假如检测二抗和捕获抗体结合,实验操作的特异性会大幅度降低。中海通常选购不同宿主的捕获抗体和检测一抗来规避以上问题。


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